在現(xiàn)代分析化學(xué)領(lǐng)域,超高效液相色譜儀已成為重要的一種分析手段。它具有高精度、高靈敏度、高分辨率等優(yōu)點(diǎn),可以對(duì)各種化合物進(jìn)行快速、準(zhǔn)確地分離、鑒定和定量,廣泛應(yīng)用于醫(yī)藥、食品、環(huán)保、生物等領(lǐng)域。
一、工原理作
利用溶液在流動(dòng)載體(流動(dòng)相)的作用下通過(guò)固定相柱進(jìn)行分離的方法。流動(dòng)相是由溶劑組成的混合物,將樣品注入到流動(dòng)相中一端的進(jìn)樣口處,經(jīng)過(guò)柱內(nèi)反應(yīng)后,被分離出來(lái)的化合物逐一通過(guò)檢測(cè)器并記錄下其信號(hào)。通常包括進(jìn)樣器、流量控制裝置、柱子、檢測(cè)器和數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)等主要部件。
二、結(jié)構(gòu)特點(diǎn)
1、皖儀自制,與?作站?縫鏈接,集優(yōu)的關(guān)鍵部件,?精度計(jì)量泵,極?提升了進(jìn)樣精確度。
2、極坐標(biāo)的設(shè)計(jì),多種進(jìn)樣?式可選,滿?各種客?使?需求,配有輔助?泵,可選擇制冷模式,智能照明設(shè)計(jì),便于觀察。
2、柱溫箱:
加熱-制冷雙向風(fēng)浴控溫,控溫柔和,受熱均勻,穩(wěn)定性高;
提供2路“250mm色譜柱+保護(hù)柱”安裝位,滿足絕大多數(shù)用戶(hù)使用需求。
3、紫外檢測(cè)器:高精度反射鏡片,1800線閃耀光柵,保證極低的雜散光和極大的線性范圍。
4、工作站:具備本地部署和網(wǎng)絡(luò)部署功能,滿足不同規(guī)模用戶(hù)的需求。
三、使用優(yōu)點(diǎn)
1、高效性:UPLC使用更小的固定相顆粒和優(yōu)化的色譜柱設(shè)計(jì),使得樣品在色譜柱內(nèi)的交互作用時(shí)間更短,從而實(shí)現(xiàn)更高的分離效率和更快的分析速度。這一特點(diǎn)使得UPLC在處理復(fù)雜樣品時(shí)具有顯著優(yōu)勢(shì)。
2、高靈敏度:由于UPLC的分離效率高、噪聲信號(hào)低,因此能夠檢測(cè)到樣品中更低濃度的組分,提高了分析的靈敏度。
3、靈活性:UPLC可以根據(jù)不同的實(shí)驗(yàn)需求選擇不同的固定相材料和流動(dòng)相組成,從而實(shí)現(xiàn)對(duì)不同樣品中不同成分的分離和檢測(cè)。此外,還可以通過(guò)改變柱溫、流速等參數(shù)來(lái)優(yōu)化分離效果。
4、易于操作:UPLC通常配備有簡(jiǎn)單易用的操作系統(tǒng)和軟件,用戶(hù)可以通過(guò)觸摸屏或電腦軟件進(jìn)行控制和數(shù)據(jù)處理,大大降低了實(shí)驗(yàn)操作的難度和時(shí)間成本。
四、操作流程一般包括以下步驟:
1、準(zhǔn)備樣品:將待測(cè)樣品制備好,通常是通過(guò)溶解、萃取、分離或者其他方法得到。
2、準(zhǔn)備色譜柱:選擇合適的色譜柱,并進(jìn)行初步的洗滌和平衡,確保柱子狀態(tài)良好。
3、調(diào)整流動(dòng)相:選擇合適的流動(dòng)相,調(diào)整pH值和緩沖鹽濃度等參數(shù),以獲得最佳的柱效和分離效果。
4、樣品進(jìn)樣:使用自動(dòng)進(jìn)樣器或手動(dòng)注射器將樣品注入色譜柱中。
5、進(jìn)行分離:開(kāi)啟色譜儀,按照設(shè)定的條件進(jìn)行分離,例如執(zhí)行溫度梯度或梯度洗脫等操作。
6、檢測(cè)分離結(jié)果:利用檢測(cè)器對(duì)分離后的組分進(jìn)行檢測(cè),并記錄數(shù)據(jù)。
7、數(shù)據(jù)處理與分析:使用數(shù)據(jù)處理軟件對(duì)獲得的數(shù)據(jù)進(jìn)行處理和分析,例如定量或鑒定分析。
8、清洗設(shè)備:在操作完成后,必須清洗色譜柱和進(jìn)樣器等設(shè)備,確保下一次使用時(shí)狀態(tài)良好。
五、提高分析速度與準(zhǔn)確度方面的作用
1、在提高分析速度方面的作用
分析速度是科研工作中非常重要的一個(gè)指標(biāo),尤其是在處理大量樣品或進(jìn)行高通量篩選時(shí)。超高效液相色譜儀憑借其優(yōu)化的色譜柱和流動(dòng)相系統(tǒng),顯著提高了分析速度。
首先,更小的顆粒度和更短的色譜柱長(zhǎng)度使得樣品在色譜柱中的傳質(zhì)速度加快,分離時(shí)間大大縮短。其次,通過(guò)優(yōu)化流速和梯度條件,超高效液相色譜儀能夠在保證分離效果的前提下,進(jìn)一步提高分析速度。此外,還具備自動(dòng)化操作的特點(diǎn),減少了人為因素的干擾,提高了工作效率。
2、在提高分析準(zhǔn)確度方面的作用
除了分析速度外,分析準(zhǔn)確度也是色譜分析技術(shù)中至關(guān)重要的一個(gè)方面。通過(guò)一系列技術(shù)手段,顯著提高了分析的準(zhǔn)確度。
首先,高靈敏度的檢測(cè)器和精密的數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)使得超高效液相色譜儀能夠準(zhǔn)確檢測(cè)樣品中的微量成分,并對(duì)其進(jìn)行定量分析。其次,通過(guò)選擇合適的色譜柱和流動(dòng)相條件,可以實(shí)現(xiàn)對(duì)復(fù)雜混合物中各組分的有效分離,減少了干擾因素的影響。此外,還具備高穩(wěn)定性和重復(fù)性的特點(diǎn),使得分析結(jié)果更加可靠。
六、應(yīng)用案例
1、在藥物研發(fā)領(lǐng)域可用于藥物的純度分析、雜質(zhì)檢測(cè)以及藥物代謝產(chǎn)物的鑒定等。通過(guò)超高效液相色譜儀的分析,研究人員可以了解藥物的化學(xué)組成和性質(zhì),為藥物的研發(fā)和優(yōu)化提供重要依據(jù)。
2、在食品安全領(lǐng)域,可用于食品中添加劑、農(nóng)藥殘留以及有害物質(zhì)的檢測(cè)。通過(guò)對(duì)食品樣品的快速、準(zhǔn)確分析,可以保障食品的安全性和質(zhì)量。
3、在環(huán)境監(jiān)測(cè)領(lǐng)域,超高效液相色譜儀可用于水體、土壤和大氣中污染物的檢測(cè)和分析。通過(guò)對(duì)環(huán)境樣品的連續(xù)監(jiān)測(cè)和分析,可以了解環(huán)境污染的狀況和趨勢(shì),為環(huán)境保護(hù)和治理提供數(shù)據(jù)支持。